酶標儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構
　　和光電比色計基本相同.
　　是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖.光源燈發出的光波經過濾光片或單色器
　　變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號.電信號經前置放大,對數放大,模數轉換等信號處理后送入微處理器進行數據處理和計算,zui后由顯示器和打印機顯示結果.
　　微處理機還通過控制電路控制機械驅動機構X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現自動進樣檢測過程.而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅動機構和控制電路,從而使儀器更小巧,結構也更簡單.
　　微孔板是一種經事先包理于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.其常見規格有40孔板,55孔板,96孔板等多種,不同的儀器選用不同規格的孔板,對其可進行一孔，一孔地檢測或一排一排地檢測.
　　酶標儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得,也可用分光光度計相同的單色器來得到.在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣,濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的.下圖便是目前常用的酶標儀光路系統圖.光源燈發出的光經聚光鏡,光欄后到達反射鏡,經反射鏡作90o反射后垂直通過比色溶液,然后再經濾光片送到光電管.